小鼠NK细胞分选试剂盒（阴选）

本产品适用于小鼠脾脏样本中自然杀伤（NK）细胞的分离。工作原理属于阴性分选，采用磁珠和单克隆抗体对非目标细胞（非NK 细胞）进行标记和去除，从而达到小鼠NK细胞分选的目的。该分选过程不直接标记NK细胞表面抗原，可最大程度减少对NK细胞活化状态及功能的影响。分选得到的NK细胞可应用于下游的分子生物学和细胞生物学实验。

产品特点：

高纯度：分选获得的小鼠NK细胞纯度可达91%。

高活性：可获得无抗体标记的功能良好的小鼠NK细胞。

操作简便：无需分离柱，搭配磁性分离器使用即可完成小鼠NK细胞的分离。

评测数据：

1. 分选后NK细胞纯度检测

使用BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒从C57BL/6小鼠的脾脏细胞中分选NK细胞。分选前后的细胞用PE anti-mouse CD3抗体（克隆号：500A2）和FITC anti-mouse CD49b抗体（克隆号：DX5）染色后进行流式细胞分析。如图1所示，脾脏初始样本中NK细胞（CD3⁻CD49b⁺）占比约为4%，分选后的NK细胞纯度可达91.57%（91.53±1.78%）。

图1. 流式检测分选前后NK细胞纯度

2. 分选后细胞活率分析

（1）使用BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒从C57BL/6小鼠的脾脏细胞中分选NK细胞。分选前后的细胞用7-AAD染色后，使用流式细胞仪检测细胞活率。如图2所示，在分选前脾脏细胞中活细胞比例为97.98%；分选后活细胞比例为91.90%。

图2. 流式检测分选前后细胞活率

（2）使用BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒从C57BL/6小鼠的脾脏细胞中分选NK细胞，进一步对分选后的CD49b⁺ 细胞群体进行活率分析。分选前后的细胞用7-AAD染色后，通过流式细胞仪检测细胞活率。如图3所示，在CD49b⁺细胞门控中，分选前活细胞比例为82.54%；经阴性分选后，CD49b⁺ 细胞群体活率提升至95.38%。

图3. 流式检测分选前后CD49b⁺细胞活率

3. 分选后NK细胞功能分析

使用BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒从C57BL/6小鼠的脾脏细胞中分选NK细胞。分选后的NK细胞加入Cell Stimulation Cocktail（含PMA、Ionomycin、Brefeldin A、Monensin）刺激4-6小时，随后通过流式细胞术检测细胞表面CD107a（LAMP-1）及胞内因子IFN-γ的表达水平。如图4所示，经Cell Stimulation Cocktail刺激后，NK细胞显著上调CD107a表达并分泌IFN-γ，细胞表现出增强的脱颗粒活性和细胞因子分泌能力。

图4. Cell Stimulation Cocktail刺激后NK细胞CD107a、IFN-γ表达上调

4. 竞品试剂盒性能对比

对比BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒和竞品NK细胞分选试剂盒得到的NK细胞纯度、活率及得率。

（1）从C57BL/6小鼠的脾脏细胞中分选NK细胞。分选前后的细胞用PE anti-mouse CD3抗体（克隆号：500A2）和FITC anti-mouse CD49b抗体（克隆号：DX5）染色后进行流式细胞分析。如图5所示，使用BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒分选得到的NK细胞纯度均高于两个竞品组（Competitor Ⅰ和Competitor Ⅱ） 。

图5. Beaver试剂盒和竞品试剂盒小鼠NK细胞阴性分选纯度比较

（2）分别使用BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒和竞品NK细胞分选试剂盒，从C57BL/6小鼠的脾脏细胞中分选NK细胞，比较细胞分选后的活率。如图6所示，BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒分选得到的NK细胞活率在脾脏细胞中均优于竞品对照组（Competitor Ⅰ和Competitor Ⅱ）。

图6. Beaver试剂盒和竞品试剂盒小鼠NK细胞阴性分选活率比较

（3）分别使用BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒和竞品NK细胞分选试剂盒，从C57BL/6小鼠的脾脏细胞中分选NK细胞，比较细胞分选后的得率。如图7所示，BeaverBeads®小鼠NK细胞阴性分选试剂盒的NK细胞得率（67.33±8.19%）均优于竞品对照组（Competitor Ⅰ和Competitor Ⅱ）。

图7. Beaver试剂盒和对照试剂盒小鼠NK细胞阴性分选得率比较

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