小鼠B细胞分选试剂盒通过阴性分选法从小鼠脾脏、淋巴结或骨髓细胞中分选B细胞。原理是选用不同的生物素(Biotin)标记单克隆抗体对非目标细胞(非B 细胞)进行标记,然后通过链霉亲和素(Streptavidin)标记的磁珠对非目标细胞进行分离,从而达到小鼠B细胞分选的目的。
产品特点:
高纯度:分选后小鼠B细胞纯度可达97.8%。
高活性:可获得无抗体标记的功能良好的小鼠B细胞。
操作简捷:无需分离柱,搭配磁性分离器25分钟即可完成分选操作。
测评数据
1. 细胞纯度分析:
用BeaverBeads® 小鼠B细胞分选试剂盒(阴选)从C57BL/6小鼠的骨髓细胞和脾细胞中分选B细胞。分选前后的细胞用FITC anti- mouse CD3抗体(克隆号145-2C11)和APC标记的anti-mouse CD19抗体(克隆号6D5)染色后进行流式细胞分析。如图1所示,骨髓细胞分选前后B细胞纯度分别为24.6%和95.8%;脾细胞分选前后B细胞纯度分别为62.9%和97.8%。
图1. 流式检测分选前后B细胞纯度
2. 细胞活率分析:
用BeaverBeads® 小鼠B细胞分选试剂盒(阴选)从C57BL/6小鼠的骨髓细胞和脾细胞中分选B细胞。分选前后的细胞用7-AAD染色后进行流式细胞分析。如图2所示,骨髓细胞分选前活细胞比例为84.3%,分选后活细胞比例为92.0%。脾细胞分选前活细胞比例为84.6%,分选后活细胞比例为88.7%。
图2. 流式检测分选前后B细胞活率
3. 细胞功能学检测:
用BeaverBeads® 小鼠B细胞分选试剂盒(阴选)从C57BL/6小鼠脾细胞中分选B细胞,加入LPS刺激24小时后,通过流式细胞术检测细胞表面活化分子的表达情况。如图3所示,LPS刺激可显著增强B细胞膜表面CD69,CD80和CD86的表达水平。
图3. LPS刺激后B细胞膜表面活化分子表达上调
4. 竞品试剂盒性能对比:
对比BeaverBeads® 小鼠B细胞分选试剂盒(阴选)和竞品B细胞分选试剂盒分选得到的B细胞的纯度和活率。
(1)从C57BL/6小鼠骨髓细胞和脾脏细胞中分选B细胞,分选前后的细胞用 FITC标记的anti-mouse B220 抗体(克隆号RA3-6B2)标记后进行流式细胞分析。如图4所示,使用BeaverBeads® 小鼠B细胞分选试剂盒(阴选)分选得到的B细胞纯度高于竞品对照组。
图4. BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选小鼠B细胞纯度比较
(2)分别使用小鼠B细胞分选试剂盒(阴选)和竞品B细胞分选试剂盒从骨髓细胞和脾细胞中分选B细胞,比较两组B细胞的活率。如图5所示,BeaverBeads® 小鼠B细胞分选试剂盒(阴选)分选得到的B细胞活率与竞品对照组相当。
图5. BEAVER试剂盒与对照试剂盒分选小鼠B细胞活率比较