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CD3和CD28可作为T细胞激活的两个重要靶点，在体外联合使用CD3和CD28抗体刺激T细胞，可以模拟体内T细胞活化的双信号作用。使用 BeaverBeads®小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠可以实现在体外简单便捷的活化及扩增 人T 细胞，无需添加饲养层细胞（抗原递呈细胞）或抗原。BeaverBeads®为直径5 µm 的惰性超顺磁珠，共价偶联抗小鼠CD3和CD28抗体，模拟抗原提呈细胞对T细胞的激活和扩增。T细胞激活和扩增后，可以通过磁力架轻松去除T细胞激活磁珠。
产品特点
磁珠激活后，48小时检测CD25+CD69+ T细胞占比86.69%；
激活后T细胞可在体外培养至21天，扩增倍数>1000倍；
操作简便，磁珠清洗后即可加入细胞，且激活及扩增过程中无需移除。
应用方向
基础免疫学研究；
细胞免疫治疗：CAR-T细胞制备、动物肿瘤模型研究等；
药物与抗体筛选：免疫调节药物、抗体功能验证。
实验案例
1. T细胞激活信号高
以分选后的小鼠CD3+ T细胞为例，使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠或进口T细胞激活磁珠与细胞共培养24小时、48小时，通过流式细胞仪检测刺激前后CD25+ CD69+ T细胞的比例。激活前CD25+ CD69+ T细胞占比为0.30%，使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠后CD25+ CD69+ T细胞占比为59.57%（24小时）、86.69%（48小时），高于进口T细胞激活磁珠组CD25+ CD69+ T细胞的占比40.41%（24小时）、69.61%（48小时）。
图1：小鼠CD3+ T细胞激活前CD25和CD69的表达，以及使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠后小鼠CD3+ T细胞CD25和CD69的表达（24小时，48小时），对比使用进口T细胞激活磁珠后小鼠CD3+ T细胞CD25和CD69的表达（24小时，48小时）。
2. T细胞增殖能力强
小鼠CD3+ T细胞激活前使用CFSE标记，随着T细胞的增殖，CFSE信号会逐渐减弱。如图2所示，BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠与CD3+ T细胞共培养2天后，T细胞CFSE的荧光信号显著降低，略优于进口T细胞激活磁珠效果。实验结果表明，BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠能够良好的刺激T细胞在体外增殖。
图2 .T细胞激活磁珠与小鼠CD3+ T细胞在体外培养3天后，T细胞的增殖能力比较。Control表示刺激前的小鼠CD3+ T细胞的CFSE信号。
将BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和小鼠CD3+ T细胞在体外进行共培养，期间每隔2天进行分孔换液，检测21天后T细胞的扩增倍数。实验结果显示，在持续培养21天过程中，BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠可以在体外实现1000倍的细胞扩增（图3A），高于进口T细胞激活磁珠的扩增倍数。我们检测了扩增过程中T细胞的活率变化，结果发现，BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠与进口T细胞激活磁珠，在扩增过程中T细胞的活率相近（图3 B）。
图3. A：比较BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和进口T细胞激活磁珠组小鼠CD3+ T细胞的增殖情况。
B：比较BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和进口T细胞激活磁珠组小鼠CD3+ T细胞的活率变化。
3. T细胞可响应磁珠的二次激活
小鼠CD3+ T细胞激活后移除磁珠，待细胞恢复静息状态后，第二次使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠，刺激小鼠CD3+ T细胞激活。结果发现，恢复静息后的小鼠CD3+ T细胞可以二次响应磁珠信号并实现激活标志物CD25、CD69的表达上调（图4）且在二次激活过程中T细胞的响应与进口T细胞激活磁珠效果相近。
图4：比较BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和进口T细胞激活磁珠组，小鼠CD3+ T细胞静息后二次刺激的检测数据。
产品信息
