CD3和CD28可作为T细胞激活的两个重要靶点,在体外联合使用CD3和CD28抗体刺激T细胞,可以模拟体内T细胞活化的双信号作用。使用 BeaverBeads®小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠可以实现在体外简单便捷的活化及扩增 人T 细胞,无需添加饲养层细胞(抗原递呈细胞)或抗原。BeaverBeads®为直径5 µm 的惰性超顺磁珠,共价偶联抗小鼠CD3和CD28抗体,模拟抗原提呈细胞对T细胞的激活和扩增。T细胞激活和扩增后,可以通过磁力架轻松去除T细胞激活磁珠。
产品特点
磁珠激活后,48小时检测CD25+CD69+ T细胞占比86.69%;
激活后T细胞可在体外培养至21天,扩增倍数>1000倍;
操作简便,磁珠清洗后即可加入细胞,且激活及扩增过程中无需移除。
应用方向
实验案例
1. T细胞激活信号高
以分选后的小鼠CD3+ T细胞为例,使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠或进口T细胞激活磁珠与细胞共培养24小时、48小时,通过流式细胞仪检测刺激前后CD25+ CD69+ T细胞的比例。激活前CD25+ CD69+ T细胞占比为0.30%,使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠后CD25+ CD69+ T细胞占比为59.57%(24小时)、86.69%(48小时),高于进口T细胞激活磁珠组CD25+ CD69+ T细胞的占比40.41%(24小时)、69.61%(48小时)。

图1:小鼠CD3+ T细胞激活前CD25和CD69的表达,以及使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠后小鼠CD3+ T细胞CD25和CD69的表达(24小时,48小时),对比使用进口T细胞激活磁珠后小鼠CD3+ T细胞CD25和CD69的表达(24小时,48小时)。
2. T细胞增殖能力强
小鼠CD3+ T细胞激活前使用CFSE标记,随着T细胞的增殖,CFSE信号会逐渐减弱。如图2所示,BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠与CD3+ T细胞共培养2天后,T细胞CFSE的荧光信号显著降低,略优于进口T细胞激活磁珠效果。实验结果表明,BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠能够良好的刺激T细胞在体外增殖。

图2 .T细胞激活磁珠与小鼠CD3+ T细胞在体外培养3天后,T细胞的增殖能力比较。Control表示刺激前的小鼠CD3+ T细胞的CFSE信号。
将BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和小鼠CD3+ T细胞在体外进行共培养,期间每隔2天进行分孔换液,检测21天后T细胞的扩增倍数。实验结果显示,在持续培养21天过程中,BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠可以在体外实现1000倍的细胞扩增(图3A),高于进口T细胞激活磁珠的扩增倍数。我们检测了扩增过程中T细胞的活率变化,结果发现,BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠与进口T细胞激活磁珠,在扩增过程中T细胞的活率相近(图3 B)。

图3. A:比较BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和进口T细胞激活磁珠组小鼠CD3+ T细胞的增殖情况。
B:比较BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和进口T细胞激活磁珠组小鼠CD3+ T细胞的活率变化。
3. T细胞可响应磁珠的二次激活
小鼠CD3+ T细胞激活后移除磁珠,待细胞恢复静息状态后,第二次使用BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠,刺激小鼠CD3+ T细胞激活。结果发现,恢复静息后的小鼠CD3+ T细胞可以二次响应磁珠信号并实现激活标志物CD25、CD69的表达上调(图4)且在二次激活过程中T细胞的响应与进口T细胞激活磁珠效果相近。
图4:比较BeaverBeads® 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠和进口T细胞激活磁珠组,小鼠CD3+ T细胞静息后二次刺激的检测数据。
产品信息

