应用案例

摘要：利用邻近标记技术，BeaverBeads^® Streptavidin(22305)磁珠捕获目的蛋白，结合质谱分析蛋白质结构，验证线粒体蛋白ERAL1参与抗RNA病毒固有免疫调控。

Fig 1. Graphical Abstract

2021年1月20日，北京大学基础医学院系统生物医学研究所游富平教授团队在Cell Press细胞出版社旗下期刊Cell Reports（IF=8.95）发表研究论文，该研究利用邻近标记技术，直接在活细胞中标记生物素，在细胞裂解液中加入BeaverBeads^® Streptavidin(22305)磁珠，富集生物素化蛋白，结合质谱分析，发现了在仙台病毒（SeV）感染后与线粒体外膜蛋白MAVS高亲和力相互作用的蛋白ERAL1，验证了线粒体蛋白ERAL1参与抗RNA病毒固有免疫调控。

Fig 2. Flow chart for MAVS-TurboID proximity-based labeling technology. ERAL1 was identified as a MAVS-interacting protein by mass spectrometry.

线粒体是天然免疫反应的中心。线粒体上的关键分子MAVS是抗病毒RLR通路信号传递的平台，目前已有多项研究发现线粒体可以释放核酸（DNA和RNA）, 以激活免疫反应。但线粒体蛋白是否被释放出来参与天然免疫反应目前鲜有报道。游教授团队发现，利用邻近标记技术，直接在活细胞中标记生物素，在细胞裂解液中加入BeaverBeads^® Streptavidin磁珠，富集生物素化蛋白，结合质谱分析发现，细胞受到仙台病毒（SeV）感染后，线粒体外膜会发生通透性改变，ERAL1蛋白被释放到细胞质中，与线粒体膜蛋白MAVS结合，从而参与抗病毒RLR通路信号传递，同时邻近标记技术还发现，ERAL1也可以与E3泛素连接酶TRIM25互作，通过依赖TRIM25的方式正向调控抗病毒RLR信号通路。综合显示，病毒感染条件下，线粒体不仅可以释放核酸，激活免疫反应，也可通过释放蛋白介导固有免疫反应，提示线粒体在固有免疫调控中的重要作用。

参考文献：The mitochondrial protein ERAL1 suppresses RNA virus infection by facilitating RIG-I-like receptor signaling

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